产品分类
PKN1 Knockout K562 Cell Pool
- 产品描述
- 细胞复苏
- 细胞传代
- 细胞冻存
- 抗体验证结果
-
- 品牌: ELEMok138cn太阳集团529
- 商品名称: PKN1 Knockout K562 Cell Pool
- 商品编号: LM01012123143
- Gene Symbol: PKN1 PAK1 PKN PRK1 PRKCL1
- Ensembl ID: ENSG00000123143
- Uniprot ID: Q16512
- 宿主细胞 / 类型: K562/人慢性髓原白血病细胞
- NCBI Gene ID: 5585
- 规格: 1×10^6 cells/ 冻存管
- 筛选标记: N/A
- 生长特性: 悬浮细胞
- 培养条件: 37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4 传代
- 倍增时间: ~24-36 hours
- 生长培养基: RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 参考换液频率: 2~3次/周
- 支原体检测结果: 阴性
- 敲除效率（Sanger测序）: >70%
- 蛋白质组验证结果: N/A
- 抗体货号: 添加中
- 目标基因介绍: PKC-related serine/threonine-protein kinase involved in various processes such as regulation of the intermediate filaments of the actin cytoskeleton, cell migration, tumor cell invasion and transcription regulation. Part of a signaling cascade that begins with the activation of the adrenergic receptor ADRA1B and leads to the activation of MAPK14. Regulates the cytoskeletal network by phosphorylating proteins such as VIM and neurofilament proteins NEFH, NEFL and NEFM, leading to inhibit their polymerization. Phosphorylates 'Ser-575', 'Ser-637' and 'Ser-669' of MAPT/Tau, lowering its ability to bind to microtubules, resulting in disruption of tubulin assembly. Acts as a key coactivator of androgen receptor (ANDR)-dependent transcription, by being recruited to ANDR target genes and specifically mediating phosphorylation of 'Thr-11' of histone H3 (H3T11ph), a specific tag for epigenetic transcriptional activation that promotes demethylation of histone H3 'Lys-9' (H3K9me) by KDM4C/JMJD2C. Phosphorylates HDAC5, HDAC7 and HDAC9, leading to impair their import in the nucleus. Phosphorylates 'Thr-38' of PPP1R14A, 'Ser-159', 'Ser-163' and 'Ser-170' of MARCKS, and GFAP. Able to phosphorylate RPS6 in vitro.
- 细胞开发路径: 采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool；Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。
- 应用: 高敲除效率的基因敲除细胞池（KO Cell Pool），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程，直接应用于多种类型的测定和分析，大幅提升实验效率。
-
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。 -
01. 取少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测，当细胞密度达到1.5x10^6 cells/mL时，可进行细胞传代。
02. 将培养基从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 取足量细胞加入盛有新鲜培养基的培养瓶中，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL。将细胞密度维持在7x10^5 cells/mL。
05. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。
-
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 将细胞收集到无菌的锥形离心管中并计数细胞。
04. 在室温下以250×g离心细胞5分钟，并小心吸出培养基。
05. 将细胞以至少2x106细胞/mL的密度重悬于冻存液中。
06. 吹打均匀后按照每管 1mL 的量分装至冻存管。
07. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
08. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。 - 抗体验证中
产品类型： 基因敲除细胞池
细胞系信息
Gene Symbol
PKN1 PAK1 PKN PRK1 PRKCL1
NCBI Gene ID
5585
Ensembl ID
ENSG00000123143
Uniprot ID
Q16512
筛选标记
N/A
宿主细胞 / 类型
K562/人慢性髓原白血病细胞
规格
1×10^6 cells/ 冻存管
生长培养基
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
生长特性
悬浮细胞
培养条件
37℃,5% CO2 的培养箱，1/2 到 1/4 传代
倍增时间
~24-36 hours
参考换液频率
2~3次/周
支原体检测结果
阴性
敲除验证
敲除效率（Sanger测序）
>70%
蛋白质组验证结果
N/A
抗体货号
添加中
抗体验证结果
细胞系说明
目标基因介绍
PKC-related serine/threonine-protein kinase involved in various processes such as regulation of the intermediate filaments of the actin cytoskeleton, cell migration, tumor cell invasion and transcription regulation. Part of a signaling cascade that begins with the activation of the adrenergic receptor ADRA1B and leads to the activation of MAPK14. Regulates the cytoskeletal network by phosphorylating proteins such as VIM and neurofilament proteins NEFH, NEFL and NEFM, leading to inhibit their polymerization. Phosphorylates 'Ser-575', 'Ser-637' and 'Ser-669' of MAPT/Tau, lowering its ability to bind to microtubules, resulting in disruption of tubulin assembly. Acts as a key coactivator of androgen receptor (ANDR)-dependent transcription, by being recruited to ANDR target genes and specifically mediating phosphorylation of 'Thr-11' of histone H3 (H3T11ph), a specific tag for epigenetic transcriptional activation that promotes demethylation of histone H3 'Lys-9' (H3K9me) by KDM4C/JMJD2C. Phosphorylates HDAC5, HDAC7 and HDAC9, leading to impair their import in the nucleus. Phosphorylates 'Thr-38' of PPP1R14A, 'Ser-159', 'Ser-163' and 'Ser-170' of MARCKS, and GFAP. Able to phosphorylate RPS6 in vitro.
细胞开发路径
采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool；Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。
应用
高敲除效率的基因敲除细胞池（KO Cell Pool），特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程，直接应用于多种类型的测定和分析，大幅提升实验效率。
细胞培养说明
细胞复苏
01. 在 37℃水浴中预热完全培养基。
02. 将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03. 将冻存管转移到生物安全柜中，并用 70% 乙醇擦拭表面。
04. 拧开冻存管管盖，将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05. 在室温下以 125g 离心 5-7 分钟，弃上清。
06. 用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07. 将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08. 参考传代比例：1/2 到 1/4 传代，2-3 天长满。
细胞传代
01. 取少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测，当细胞密度达到1.5x10^6 cells/mL时，可进行细胞传代。
02. 将培养基从 4℃冰箱中拿出， 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
03. 从培养箱中取出待传代的培养瓶，瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04. 取足量细胞加入盛有新鲜培养基的培养瓶中，按需求调整接种比例，并补充培养瓶中完全培养基，T75 加至 13-15mL，T25 加至 5mL。将细胞密度维持在7x10^5 cells/mL。
05. 盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身，使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。
细胞冻存
01. 准备冻存液，并提前预冷。
02. 确保待冻存的细胞满足冻存要求，用显微镜检查以下状态：健康的外观及形态特征、所处生 长周期（对数晚期）、无污染或衰退迹象。
03. 将细胞收集到无菌的锥形离心管中并计数细胞。
04. 在室温下以250×g离心细胞5分钟，并小心吸出培养基。
05. 将细胞以至少2x106细胞/mL的密度重悬于冻存液中。
06. 吹打均匀后按照每管 1mL 的量分装至冻存管。
07. 将细胞放在程序降温盒中，在 -80℃冰箱中冷冻。
08. 后续将细胞转移到液氮罐中，以便长期储存。